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細胞周期的測定步驟
細胞周期指細胞一個世代所經(jīng)歷的時間。從一次細胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期。細胞周期反應(yīng)了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多，有同位素標(biāo)記法、細胞計數(shù)法等，這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
操作步驟：
1、細胞生長至指數(shù)期時，向培養(yǎng)液中加入BrdU，使終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素，使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規(guī)消化細胞至離心管中，注意培養(yǎng)上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規(guī)染色體制片（見第三部分：染色體技術(shù)）。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上，鋪上2×SSC 液，距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液，流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘，流水沖洗，晾干。
8、鏡檢100個分裂相，計、二、三、四細胞期分裂指數(shù)。
9、計算： 細胞周期（Tc）=48/{（M1+2M2+3M3+4M4）/100}（小時）
附：（1）BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml 4℃下避光保存。
（2）2×SSC配制: NaCl 1.75克，檸檬酸三鈉?2H2O 0.88克，加水至100ml，4℃保存。