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核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)質(zhì)量控制及結(jié)果判讀
質(zhì)量控制:
1.陰性對(duì)照:Ct 值>38 或未檢出。
2.陽(yáng)性對(duì)照:擴(kuò)增曲線(xiàn)呈 S 型,且 Ct 值≤30。
3.同一實(shí)驗(yàn)以上要求需同時(shí)滿(mǎn)足,否則本次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
4.每種檢測(cè)靶標(biāo)都需設(shè)陰陽(yáng)對(duì)照,不同的靶標(biāo)根據(jù)對(duì)應(yīng)陰性調(diào)整基線(xiàn)閾值。
結(jié)果判讀:
1.FAM 通道檢測(cè) B 組鏈球菌。
2.陰性:Ct 值>38 或未檢出。
3.陽(yáng)性:擴(kuò)增曲線(xiàn)呈 S 型,且 Ct 值≤35。
4.可疑:擴(kuò)增曲線(xiàn)呈 S 型,且 35<Ct 值≤38,需復(fù)檢;復(fù)檢結(jié)果若一致,判定結(jié)果為陽(yáng)性。
檢驗(yàn)方法的局限性:
1.樣品采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng),試劑運(yùn)輸、保存、配置不當(dāng)都可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至?xí)?dǎo)致假陰性結(jié)果。
2.如果實(shí)驗(yàn)室污染、試劑污染、樣品交叉污染,可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。