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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
人胰腺成纖維細胞 |
英文名稱 |
Primary human pancreatic fibroblasts |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1360 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細胞介紹:
胰腺為人體內僅次于肝臟的**大腺體,是內外分泌混合腺。
胰腺表面覆蓋有薄層疏松結締組織,并深入腺實質,這些結締組織主要由成纖維細胞構成。
1)細胞來源于人手術胰腺組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:長梭形,貼壁培養(yǎng)。
推薦使用 delf原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內,5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質, 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質很充足, 也很難使細胞適應從體內的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人原代舌表皮細胞 |
人原代喉黏膜上皮細胞 |
ADGRA3 Antibody Blocking Peptide |
人原代胎盤絨毛膜間質細胞 |
小鼠原代結腸成纖維細胞 |
Phospho-Dab1 (Tyr232) Antibody Blocking Peptide |
兔原代結膜囊成纖維細胞 |
兔原代前脂肪細胞 |
phospho-ROCK2 (Tyr256) Antibody Blocking Peptide |
豬原代骨骼肌衛(wèi)星細胞 |
小鼠淋ba內皮細胞 |
phospho-Mre11 (Ser678) Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代肺微血管內皮細胞 |
人原代睪丸白膜上皮細胞 |
SETD7 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代皮下微血管內皮細胞 |
人原代腸系膜動脈平滑肌細胞 |
LY6E Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代造血干細胞 |
人原代牙齦成纖維細胞 |
HAPLN3 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代少突小膠質細胞 |
人原代扁桃體動脈內皮細胞 |
MCSF Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代滑膜間充質干細胞 |
小鼠原代牙齦成纖維細胞 |
STMN2 Antibody Blocking Peptide |
兔原代zi宮內膜間質細胞 |
大鼠原代海馬神經(jīng)干細胞 |
TPP1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代腎上腺皮質細胞 |
大鼠原代骨髓單核細胞 |
Gamma Thrombin Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代韌帶成纖維細胞 |
小鼠原代盲腸上皮細胞 |
phospho-HSP70 (Tyr41) Antibody Blocking Peptide |
人原代骨微血管內皮細胞 |
人原代膽囊上皮細胞 |
Ghrelin 28 Active Peptide |
小鼠原代視網(wǎng)膜微血管周細胞 |
大鼠原代眼外肌成纖維細胞 |
TSPAN17 Antibody Blocking Peptide |
兔原代髓核細胞 |
大鼠原代內皮祖細胞 |
人胰腺成纖維細胞Metronidazole/OVA |