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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
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產(chǎn)品名稱 |
人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary human pulmonary artery endothelial cells; (HPAEC) |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X1260 |
產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹：
肺動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種多功能細(xì)胞，尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當(dāng)其受損，肺血管通透性升高導(dǎo)致肺水腫，在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機(jī)制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復(fù)雜環(huán)境中，對(duì)肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機(jī)制很難作深入研究。原代肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能。
1)組織來(lái)源于人的正常肺動(dòng)脈組織。
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說(shuō)，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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NCI-H23人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
羊原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
CMTM3 Antibody Blocking Peptide |
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HEC-1-Azi宮癌 |
兔原代垂體細(xì)胞 |
CSDC2 Antibody Blocking Peptide |
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NP69-SV40T永生化人鼻咽上皮細(xì)胞 |
兔原代腎小球系膜細(xì)胞 |
TRPM1 Antibody Blocking Peptide |
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GP2-293Luc人胚腎上皮包裝細(xì)胞 |
小鼠原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 |
Pre-X protein Antibody Blocking Peptide |
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TU 686喉癌細(xì)胞 |
大鼠原代前脂肪細(xì)胞 |
DPEP1 Antibody Blocking Peptide |
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4T1/GFP4T1/GFP 小鼠乳腺癌細(xì)胞帶綠色熒光 |
人原代硬腦膜成纖維細(xì)胞 |
SF3A3 Antibody Blocking Peptide |
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SUNE-1亞株6-10B |
人原代淋ba結(jié)成纖維細(xì)胞 |
CEP27 Antibody Blocking Peptide |
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兔原代卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
人原代小氣道上皮細(xì)胞 |
KLHDC8B Antibody Blocking Peptide |
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綿羊原代卵巢顆粒細(xì)胞 |
人原代角膜上皮細(xì)胞 |
AVPR2 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代zi宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 |
兔原代腸粘膜上皮細(xì)胞 |
GEMIN4 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
大鼠原代眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
SPIN2B Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代卵泡膜細(xì)胞 |
大鼠原代腦血管周細(xì)胞 |
ARNTL2 Antibody Blocking Peptide |
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豬原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 |
大鼠原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
FAM174C Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞 |
小鼠原代肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
NIPAL1/NIPA3 Antibody Blocking Peptide |
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人原代卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞 |
人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞ATE1 Antibody Blocking Peptide |