檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書：
中文名稱：PDCN人Podocin蛋白elisa試劑盒說明書
英文簡稱：Human Podocin(PDCN)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：PH103068
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

分子篩, 5 ?(pellets, 2.5-3.5 mm)  Molecular sieves, 5 ?  質(zhì)量規(guī)格：pellets, 2.5-3.5 mm 犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒 Canine ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit

高嶺土(CP)  Kaolin  質(zhì)量規(guī)格：CP 犬胰島素(INS)試劑盒 Dog Insulin,INS ELISA Kit

超細(xì)高嶺土(325(44um))  Kaolin(superfine)  質(zhì)量規(guī)格：325(44um) 犬胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒CanineInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 96T/48T

超細(xì)高嶺土(1250(11um))  Kaolin(superfine)  質(zhì)量規(guī)格：1250(11um) 犬胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT

超細(xì)高嶺土(3000(5um))  Kaolin(superfine)  質(zhì)量規(guī)格：3000(5um) 犬胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 Dog insulin-like growth factor 1,IGF1 ELISA kit

超細(xì)高嶺土(6000(3.5um))  Kaolin(superfine)  質(zhì)量規(guī)格：6000(3.5um) 犬胰島素樣生長因子II(IGF2)試劑盒 Dog Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit

高嶺土(醫(yī)藥級(jí))  Kaolin  質(zhì)量規(guī)格：醫(yī)藥級(jí) 犬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 Dog insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3 ELISA kit

硅藻土G(TLC)  Kieselguhr G  質(zhì)量規(guī)格：TLC 犬胰島素樣因子3(INSL3)試劑盒 Dog insulin-like 3,INSL3 ELISA Kit

硅膠(AR)  Silica gel  質(zhì)量規(guī)格：AR 犬胰島素原(PI)試劑盒 Canine Proinsulin,PI ELISA Kit

二氧化硅(99.99%,1-3mm)  Silicon dioxide  質(zhì)量規(guī)格：99.99%,1-3mm 犬胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 Dog glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 霉酚酸?；?β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC阿莫西林-d4Amoxicillin-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿莫西林三水合物Amoxicillin trihydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]二氫非諾貝特Dihydro Fenofibrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠尿激酶elisa試劑盒   小鼠尿激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠尿激酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠尿激酶試劑盒、小鼠尿激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  N-(2-Hydroxyethyl)-3-(4-nitrophenyl)propylamine  130634-09-2  中文名：  分子式：PDCN人Podocin蛋白elisa試劑盒說明書C11H16N2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠尿蛋白（UP）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P 

小鼠鳥酸脫羧酶   英文名稱：   Mouse Ornithine Decarboxylase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ODC  Fluorocytosine  中文名：  分子式：C4H4FN3O  度：98.0%

小鼠黏膜選擇素黏附分子1   英文名稱：   Mouse Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MADCAM-1  Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名：  分子式：C34H32O10 

小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Flumethasone  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5  度：98.0%