檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說明書：
中文名稱：PC人丙酮酸羧化酶進口檢測試劑盒
英文簡稱：Human Pyruvate Carboxylase(PC)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：PH102582
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

香草醛（熔點標(biāo)準(zhǔn)品） Vanillin質(zhì)量規(guī)格：熔點測定  犬17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 Canine 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit  人尿苷二1酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1) ELISA 劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  英文名稱HumanCoisolELISAKit人皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格：96T/48T  小鼠維生素B12(VB12)試劑盒 Mouse Vitamin B12,VB12 ELISA Kit

環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品  蛋白酶抑制劑混合液保留細(xì)胞內(nèi)成分活性A、動物細(xì)胞B、C、酵母菌D、植物  猩紅熱鏈球菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

十二水合硫酸鐵銨(>98%,BR)Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  RatMetallothionein,MTELISA試劑盒大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  humansnailhomolog2,SNAI2ELISA試劑盒人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
硼試劑1-Hydroxy-4-p-toluidinoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：AR  小鼠胰島素樣蛋白6(INSL6)ELISA試劑盒 ，英文名： INSL6 ELISA Kit  ELISAKitD2D豬D二聚體規(guī)格：48T/96T

石蕊L(fēng)itmus質(zhì)量規(guī)格：AR  兔子白介素4(IL-4)ELISA檢測試劑盒rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 96T/48T  Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硝酸鈀Palladium (II) nitrate dihydrate質(zhì)量規(guī)格：BR  犬多肽YY(PYY)試劑盒 Dog Peptide YY,PYY ELISA kit  人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鈀粉(>99%,BR)Palladium, powder質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  英文名稱HumanmicroalbunminuriaELISAKIT人微量白蛋白尿(ALB)規(guī)格：96T/48T  小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT
活性炭顆粒(AR,20-50目)質(zhì)量規(guī)格：AR,20-50目Activated charcoal  Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 ELISA試劑盒  Humanai-Endostatinaibody,ES-AbELISA試劑盒人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)Lauric acid  humanProstaglandinD2-PC人丙酮酸羧化酶進口檢測試劑盒methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲1前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

神經(jīng)酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)Nervonic acid  Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAbELISA試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人TATA盒結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Pentadecanoic Acid  植物酸性1酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20  兔子Dickkopf 1(DKK1)試劑盒 Rabbit Dickkopf 1,DKK1 ELISA Kit