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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:PKCη人蛋白激酶Cη免費代測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:PH102395
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
PKCη人蛋白激酶Cη免費代測試劑盒售后:我公司具有上等的技術(shù)團隊,產(chǎn)品一旦售出,實驗過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用PKCη人蛋白激酶Cη免費代測試劑盒時沒有任何的后顧之憂。
詳情介紹:

服務:
      我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

PKCη人蛋白激酶Cη免費代測試劑盒

Human Protein Kinase C Eta(PKCh)ELISA Kit

PH102395

優(yōu)勢特點:產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經(jīng)費。 

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
巖白菜素Bergenin質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR  小鼠誘導型合酶(NOS2)ELISA試劑盒 ,英文名: NOS2 ELISA Kit  ELISAKitEPI豬規(guī)格:48T/96T

鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿(標準品)Palmatine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品  兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T  humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember12,EAR12ELISAKit人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿Palmatine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR  犬基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit  人糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鹽酸黃柏堿(標準品)Phellodendrine chloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品  英文名稱HumanangiotensionIIELISAKit人血管緊張素II(ANGII)規(guī)格:96T/48T  豬白介素18(IL-18)試劑盒 Porcine Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit
曲唑酮鹽酸鹽-d6質(zhì)量規(guī)格:美國進口Trazodone-d6   Rat platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒  HumanLebtospiraIgMELISA試劑盒人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

N-去甲基米非司酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Demethyl Mifepristone  Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  HumanNeuroophin4,-4ELISAKit人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

米氮平-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Mirtazapine-d3  HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA試劑盒人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  大鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRP-Ghrelin ELISA Kit

米氮平N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Mirtazapine N-Oxide  組織PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20  人本周蛋白(BJP)ELISA檢測試劑盒HumanBence-Jonesprotein,BJPELISAKit 96T/48T
金胺O(標準品)質(zhì)量規(guī)格:檢查AURAMINE O   大鼠信號轉(zhuǎn)導分子(Smad1)ELISA檢測試劑盒Ratsignalansduction-Smad1ELISAKit 96T/48T  石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVETISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50

胭脂紅(標準品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Carmine  人CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒 Human CXCL16 ELISA Kit  ELISAKitMYO/MB人肌紅蛋白規(guī)格:48T/96T

赤蘚紅(標準品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Acid Red 51  英文名稱MouseT4ELISAKit小鼠高敏甲狀腺素(T4)規(guī)格:96T/48T  大鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

酸性紅 73(標準品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Acid Red 73  冰凍切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50  人胃泌素釋放多肽(GRP)試劑盒 Human GRP ELISA Kit
PKCη人蛋白激酶Cη免費代測試劑盒操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

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