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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
貨號 |
UBQLN4人泛醌蛋白4博湖elisa試劑盒 |
Human Ubiquilin 4(UBQLN4)ELISA Kit |
PH102217 |
優(yōu)勢特點:產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節(jié)省實驗經(jīng)費。
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
鹽酸金剛烷胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Amantadine HCl 人紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA檢測試劑盒Humanerythrocytemembraneprotein,EMPELISAKit
96T/48T Humanepidemicparotitis,EPELISA試劑盒人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
福多斯坦質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRFudosteine 大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 Rat Brain derived neuroophic facor,BDNF ELISA Kit HumanHexokinase,HKELISAKit人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
福多斯坦(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Fudosteine 英文名稱RatMaixmetalloproteinase-3—MMP-3ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISAkit規(guī)格:96T/48T 貓細小病毒抗體(FPV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羅庫溴銨質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,EP6.0Rocuronium
Bromide 酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升 人整合素αM型(ITG αM/CD11b) 試劑盒 Human Iegrin αM ELISA Kit
噻蟲啉(標準品)Thiacloprid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ,英文名: AChRab ELISA Kit ELISAKitT豬睪同規(guī)格:48T/96T
三環(huán)唑標準溶液(100μg/ml,u=2%)Tricyclazol solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% 小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA檢測試劑盒Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 96T/48T HumanDopamineD1receptor,D1RELISAKit人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
水楊苷D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒 Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 人胎盤催乳素(HPL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
水楊苷(標準品)D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 RatAi-ypsin,ATELISAKit大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 Pig Bcl-2 Assaciated X
protein,BAX ELISA Kit
1Cortisone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
AP-NPP底物顯色試劑盒10 載脂蛋白C2(Apo-C2)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-C2 ELISA Kit
5-羥-丹曲林5-Hydroxy Dantrolene質(zhì)量規(guī)格:美國進口 Mousehepaticlipase,HLELISA試劑盒小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISA試劑盒人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卡那替尼Canertinib 2HCl質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 小鼠髓細胞觸受體2(EM2)ELISA試劑盒 ,英文名: EM2 ELISA Kit ELISAKitMMP-10小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10規(guī)格:48T/96T
卡培他濱Capecitabine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA檢測試劑盒g(shù)uineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit
96T/48T
HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISAKit人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
UBQLN4人泛醌蛋白4博湖elisa試劑盒操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。