操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

優(yōu)勢特點：產(chǎn)品僅用于科研
1.高效、靈敏、特異的抗體；
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相載體；
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標本類型；
5.節(jié)省實驗經(jīng)費。 

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板：一塊(96孔) 
2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔)，實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
油酸甲酯(分析標準品,>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,>99.0%(GC)Methyl oleate  PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 ，英文名： i-PTH ELISA Kit

異丁香酚(正+反)(分析標準品,用于環(huán)境分析)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,用于環(huán)境分析Isoeugenol  小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

正壬烷(分析標準品,≥99.8%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.8%(GC)Nonane  Rat follistatin (FS) ELISA Kit 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒  Humanai-Epstein-Barrvirusaibody,EBVELISA試劑盒人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-萘酚(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品1-Naphthol  humahyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit 人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  HumanBreastandkidneyexpressedchemokine,BRAKELISAKit人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
特非那定Terfenadine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  10%Formalin固著液50毫升  對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

維生素C鈉（標準品） ascorbate質(zhì)量規(guī)格：含量測定  MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanProgesterone,PROGELISA試劑盒人孕/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硝酸硫胺（標準品）Thiamine nitrate質(zhì)量規(guī)格：含量測定  小鼠血小板衍生生長因子B(PDGFB)ELISA試劑盒 ，英文名： PDGFB ELISA Kit  ELISAKitTFR/CD71小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格：48T/96T

α-細辛腦,細辛(標準品)alpha-Asarone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標準品  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA檢測試劑盒rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 96T/48T  HumanCoisolELISAKit人皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
氯化銨(AR)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,ARAmmonium chloride  雞α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒ChickenIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T  羥脯氨酸(HYP)含量高效液相色譜定量檢測試劑盒20

水楊酸(AR)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,ARSalicylic acid  人17-α-羥化酶(17-α-OH)試劑盒 Human 17-α-hydroxylase,17-α-OH ELISA Kit  ELISAKitEMAb人抗眼肌抗體規(guī)格：48T/96T

L-酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARL-Tartaric acid  英文名稱MouseCD40LELISAKit小鼠CD40L規(guī)格：96T/48T  大鼠總膽紅素(TB)ELISA試劑盒 ，英文名： TB ELISA Kit

二甲基脲質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRN,N'-Dimethylurea  冰凍切片組織αSMA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA檢測試劑盒Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 96T/48T
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。

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