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一抗是屬于哪個類或亞類確定指引
日期：2025-05-21 16:45
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摘要：
除了要與一抗的種屬來源相一致，二抗還需與一抗的類別或亞類相匹配，這通常是針對單克隆抗體而言。一般來說多克隆抗體主要是IgG類免 疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。而單克隆抗體則相對復(fù)雜些，由于單克隆抗體有不同的類別和亞型，因此相應(yīng)的二抗也需要根據(jù)這些亞型進行選擇。
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品說明書中都會有描述，如果您的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgG抗體。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，...
除了要與一抗的種屬來源相一致，二抗還需與一抗的類別或亞類相匹配，這通常是針對單克隆抗體而言。一般來說多克隆抗體主要是IgG類免 疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。而單克隆抗體則相對復(fù)雜些，由于單克隆抗體有不同的類別和亞型，因此相應(yīng)的二抗也需要根據(jù)這些亞型進行選擇。
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品說明書中都會有描述，如果您的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgG抗體。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者您也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果您的一抗是小鼠IgG1，那么您可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下，可以選用抗相應(yīng)物種IgG，因為此種抗體可以識別大多數(shù)類型的IgG免 疫球蛋白。
下面總結(jié)了幾種具有不同特異性的二抗：
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品說明書中都會有描述，如果您的一抗是小鼠IgM，那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgG抗體。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合，或者您也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果您的一抗是小鼠IgG1，那么您可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下，可以選用抗相應(yīng)物種IgG，因為此種抗體可以識別大多數(shù)類型的IgG免 疫球蛋白。
下面總結(jié)了幾種具有不同特異性的二抗：
針對整個抗體分子（H＋L）具有特異性：
如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結(jié)合也可以與輕鏈結(jié)合，即與抗體分子的Fc，F(xiàn)(ab')2/Fab部分均可反應(yīng)，anti-IgG(H+L)也可以與其他免 疫球蛋白家族反應(yīng)（如IgM和IgA），因為所有的免 疫球蛋白都具有相同的輕鏈（κ鏈或λ鏈）。
針對Fab片段具有特異性：
這類抗體與重鏈輕鏈均可以結(jié)合，由于它們可以與輕鏈反應(yīng)，它們同時也可以和具有相同輕鏈的其他種類的免 疫球蛋白反應(yīng)。
針對Fc片段或重鏈具有特異性：
這類抗體和重鏈的Fc部分反應(yīng)，因此它們是類別特異性的。即gamma鏈特異性抗體只與IgG反應(yīng)，mu鏈特異性抗體只識別IgM，依此類推。
輕鏈（lambda，kappa）特異性：
與所有類別的抗體反應(yīng)，因為所有類別的抗體均具有相同的lambda鏈或kappa鏈。
經(jīng)過吸附處理的二抗：
不同來源的免 疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu)，抗一個物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng)，因此有些二抗經(jīng)過了動物或人類IgG吸附處理，以減少非特異性背景。例如，如果是小鼠的組織或細胞，那么選擇經(jīng)小鼠血清或IgG吸附處理過的二抗可以減少非特異性結(jié)合。但是此種抗體識別表位的數(shù)量被大大減少。
如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結(jié)合也可以與輕鏈結(jié)合，即與抗體分子的Fc，F(xiàn)(ab')2/Fab部分均可反應(yīng)，anti-IgG(H+L)也可以與其他免 疫球蛋白家族反應(yīng)（如IgM和IgA），因為所有的免 疫球蛋白都具有相同的輕鏈（κ鏈或λ鏈）。
針對Fab片段具有特異性：
這類抗體與重鏈輕鏈均可以結(jié)合，由于它們可以與輕鏈反應(yīng)，它們同時也可以和具有相同輕鏈的其他種類的免 疫球蛋白反應(yīng)。
針對Fc片段或重鏈具有特異性：
這類抗體和重鏈的Fc部分反應(yīng)，因此它們是類別特異性的。即gamma鏈特異性抗體只與IgG反應(yīng)，mu鏈特異性抗體只識別IgM，依此類推。
輕鏈（lambda，kappa）特異性：
與所有類別的抗體反應(yīng)，因為所有類別的抗體均具有相同的lambda鏈或kappa鏈。
經(jīng)過吸附處理的二抗：
不同來源的免 疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu)，抗一個物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng)，因此有些二抗經(jīng)過了動物或人類IgG吸附處理，以減少非特異性背景。例如，如果是小鼠的組織或細胞，那么選擇經(jīng)小鼠血清或IgG吸附處理過的二抗可以減少非特異性結(jié)合。但是此種抗體識別表位的數(shù)量被大大減少。