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推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代上皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠氣管上皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Rat tracheal epithelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X1520 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
操作步驟如下：
細(xì)胞介紹：
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常氣管組織。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
在近端下呼吸道的上皮表面，主要是纖毛上皮細(xì)胞，它與基底細(xì)胞及杯狀細(xì)胞一起構(gòu)成假?gòu)?fù)層上皮，到達(dá)氣管腔表面的大部分細(xì)胞為纖毛上皮細(xì)胞，基底細(xì)胞與基底膜相連，通過(guò)半橋粒固定于上皮，在遠(yuǎn)端下呼吸道中，Clara細(xì)胞和基底細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)，纖毛細(xì)胞已不存在，杯狀細(xì)胞數(shù)量減少，上皮形態(tài)更象柱狀，整個(gè)上皮存在于一薄層基底膜上，通過(guò)間質(zhì)結(jié)締組織組成的網(wǎng)狀層相互支撐，上皮下存在其它的結(jié)締組織和纖維細(xì)胞。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說(shuō)，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
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NCI-H841小細(xì)胞肺癌 |
CCD-1068Sk乳腺癌 |
CXCL13 Antibody Blocking Peptide |
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293 c18 (STR)人胚腎細(xì)胞 |
HCC2157乳腺癌 |
Phospho-TSC2 (Thr927) Antibody Blocking Peptide |
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h9(WAO9)人胚胎干細(xì)胞 |
OCUB-M乳腺癌 |
CHCHD6 Antibody Blocking Peptide |
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92-1 92.1人葡萄膜黑色素瘤 |
RT4-D6P2T神經(jīng)鞘瘤 |
CASP8AP2 Antibody Blocking Peptide |
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SNU-790人狀甲狀腺癌細(xì)胞 |
VMRC-RCZ腎細(xì)胞癌 |
SPHKAP Antibody Blocking Peptide |
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T47D-LUC-PURO人乳腺癌細(xì)胞 |
BWEL水牛細(xì)胞 |
Lgr5/GPR49 Antibody Blocking Peptide |
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U343人神經(jīng)膠質(zhì)母 |
KON頭頸部鱗狀細(xì)胞癌 |
ARMCX3 Antibody Blocking Peptide |
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SK-WEP-1人腎母細(xì)胞 |
104C1豚鼠胚胎細(xì)胞 |
IRF2BP2 Antibody Blocking Peptide |
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TE-7 (STR)人食管癌細(xì)胞 |
Neuro-2a/LUC小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 |
SPARCL1 Antibody Blocking Peptide |
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HLF人未分化肝癌 |
CT26/LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 |
SIRT5 Antibody Blocking Peptide |
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SW684人纖維肉瘤細(xì)胞 |
NCC-StC-K140胃癌 |
NEK6 Antibody Blocking Peptide |
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HECV人血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
HT-1080纖維肉瘤 |
phospho-GRLF1 (Tyr1105) Antibody Blocking Peptide |
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hTERT-HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞 |
GT1-7小鼠垂體瘤細(xì)胞 |
KCNQ2 Antibody Blocking Peptide |
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RWPE-2 (STR)人正常前列腺上皮細(xì)胞 |
H22-H8D8小鼠肝癌細(xì)胞 |
G3BP2 Antibody Blocking Peptide |
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SW756人zi宮鱗狀癌細(xì)胞 |
IDG-SW3小鼠骨髓細(xì)胞 |
大鼠氣管上皮細(xì)胞TEFF1 Antibody Blocking Peptide |