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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠膈肌細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary rat diaphragm cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1667 |
細(xì)胞介紹：
膈肌是位于胸腔與腹腔之間的肌肉纖維組織，其周圍為肌腹，中央為腱膜，是機(jī)體重要的呼吸肌。
1） 細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動物正常膈肌組織。
推薦使用 delf原代骨骼肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)試劑。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
組織學(xué)上，膈肌屬骨骼肌，成熟的骨骼肌纖維不具有增殖能力。骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是骨骼肌與肌膜之間的一種體積較小的細(xì)胞，排列在肌纖維的表面，當(dāng)肌纖維損傷后，可分化為肌纖維修復(fù)損傷。隨著組織發(fā)育的成熟，肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量相對減少。
2） 細(xì)胞鑒定：肌動蛋白（α-actin）免yi熒光染色為陽性。
3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5） 細(xì)胞生長方式：長梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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MEG-01人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
人乳腺癌（腫瘤）細(xì)胞 |
FNDC4 Antibody Blocking Peptide |
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兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 |
人腎上腺包膜成纖維細(xì)胞 |
GCGR Antibody Blocking Peptide |
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人胃平滑肌細(xì)胞 |
小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 |
SETD9 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠氣道平滑肌細(xì)胞 |
小鼠黏膜上皮細(xì)胞 |
HOXD10 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠滑膜成纖維細(xì)胞 |
大鼠盲腸上皮細(xì)胞 |
FOXN1 Antibody Blocking Peptide |
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人口腔成纖維細(xì)胞 |
兔單核細(xì)胞 |
SHKBP1 Antibody Blocking Peptide |
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豬甲狀腺上皮細(xì)胞 |
人支氣管平滑肌細(xì)胞 |
CYP24A1 Antibody Blocking Peptide |
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兔內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
兔牙周膜成纖維細(xì)胞 |
TLR9 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠牙髓干細(xì)胞 |
人惡性黑色素瘤細(xì)胞SK-MEL-2 (STR鑒定正確) |
Streptavidin / PE |
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人臍血DC細(xì)胞 |
人皮膚成纖維細(xì)胞Hs865.Sk(STR鑒定正確) |
SYNPO Antibody Blocking Peptide |
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小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞 |
豬附睪上皮細(xì)胞 |
OXR1 Antibody Blocking Peptide |
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人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠成纖維細(xì)胞PA317（種屬鑒定） |
RPL5 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠前列腺基底細(xì)胞 |
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞A-204(STR鑒定正確) |
DUSP13 Antibody Blocking Peptide |
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人破骨細(xì)胞 |
人骨肉瘤細(xì)胞帶熒光素酶143B+LUC(STR鑒定正確) |
MMP2 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 |
人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞 KU812 (STR鑒定正確) |
大鼠膈肌細(xì)胞NOC3L Antibody Blocking Peptide |