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產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
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產(chǎn)品名稱 |
人乳腺成纖維細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary human breast fibroblasts cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1369 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結(jié)締組織對ru房起固定作用，而纖維結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成的。
起支持作用和固定ru房位置的纖維結(jié)締組織稱為ru房懸韌帶或 Coopers韌帶。淺筋膜深層位于乳腺的深面，與胸大肌筋膜淺層之間有疏松組織相連，稱ru房后間隙。它可使ru房既相對固定，又能在胸壁上有一定的移動性。
1)細(xì)胞來源于手術(shù)切除的正常乳腺組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品的運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團或分散的單個細(xì)胞，以利于進一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒炈杳芏?，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進行傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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HMY-1人黑色素瘤細(xì)胞 |
人原代扁桃體成纖維細(xì)胞 |
MPP9/MPHOSPH9 Antibody Blocking Peptide |
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兔原代甲狀腺上皮細(xì)胞 |
小鼠原代主動脈弓內(nèi)皮細(xì)胞 |
CACNA1G + CACNA1H Antibody Blocking Peptide |
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大鼠原代腦微血管周細(xì)胞 |
小鼠原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
COMTD1 Antibody Blocking Peptide |
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兔原代肝卵圓細(xì)胞 |
大鼠原代肺巨噬細(xì)胞 |
Brevican Antibody Blocking Peptide |
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綿羊原代前脂肪細(xì)胞 |
原代牛骨骼肌細(xì)胞 |
GUCY1B2 Antibody Blocking Peptide |
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兔原代睪丸間質(zhì)細(xì)胞 |
大鼠原代主動脈平滑肌細(xì)胞 |
ROM1 Antibody Blocking Peptide |
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人原代zi宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
兔原代脾淋ba細(xì)胞 |
NF-E2 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞 |
小鼠原代卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
Nestin Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代zi宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
雞胃上皮細(xì)胞 |
GPR132 Antibody Blocking Peptide |
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人原代肺動脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞 |
APOA1 Antibody Blocking Peptide |
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人原代腮腺腫瘤細(xì)胞 |
人原代輸尿管上皮細(xì)胞 |
phospho-AKT1+AKT2 (Thr308+Thr309) Antibody Blocking Peptide |
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人原代腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 |
大鼠原代T淋ba細(xì)胞 |
Phospho-p90RSK (Ser380) Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代肺巨噬細(xì)胞 |
兔原代腹腔主動脈平滑肌細(xì)胞 |
LIM2 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠原代甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
人原代食管上皮細(xì)胞 |
NXT2 Antibody Blocking Peptide |
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牛原代小腸黏膜上皮細(xì)胞 |
人口腔角質(zhì)形成細(xì)胞 |
人乳腺成纖維細(xì)胞phospho-ITGB3( Tyr785) Antibody Blocking Peptide |