實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學研究

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個 
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺； 

培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

2，4，6-Trichlorophenoxyacetic acid，cert TricaineMethanesulfonate 575-89-3 純品型，100mg 特征形態(tài) 固態(tài)

2,4,5-Trichlorophenol ethanolamine salt,c 2,4,6-Tri-tert-butylphenol - 純品型，0.1G 特征形態(tài) 固態(tài)

3,4,5-Trichlorophenol acetate Tributylethyltin - 純品型，25mg 特征形態(tài) 固態(tài)
Leucokinin IV  SIKVAV  Ac-Phe-Arg-OEt  Entero-Kassinin  Acetyl-Hirudin (55-65)(sulfated)

Leucokinin III  Laminin α -1 Chain (2722-2729) (mouse)  Neo-Kyotorphin  Kassinin  Hirudin (55-65)(sulfated)

Leucokinin II  Cys-Laminin A chain (2091-2108)  c(D-Arg2)-Kyotorphin  AF11377  Acetyl-Hirudin (55-65)(desulfated)

Leucokinin I  Laminin Fragment (925-933) Amide  Kisspeptin-54 (human)  IL-1 Receptor Peptide (human)  Acetyl-Hirudin (54-65) (sulfated)

Leptin (150-167) (human)  Laminin β -1 Chain (925-933) (human, mouse)  Kisspeptin-13 (4-13)(human)  IL-8 Inhibitor,Antileukinate  Hirudin (54-65)(sulfated)
原人參三醇 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

原薯蕷皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

原蘇木素B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

原偽金絲桃素 HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒小鼠促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠華蟾蜍精 HPLC≥98% 20mg Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA試劑盒小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠志山酮III HPLC≥98% 20mg Mouseadrenomedullin,ADMELISA試劑盒小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠志酸 HPLC≥98% 20mg Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISA試劑盒小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠志糖苷C HPLC≥98% 20mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠志皂苷B HPLC≥98% 5mg MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISA試劑盒小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠志皂苷D HPLC≥98% 20mg Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
收到如何處理:
1、首先，觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、hct-15細胞懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。