檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：
中文名稱(chēng)：KLF2人Kruppel樣因子2進(jìn)口檢測(cè)試劑盒
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：Human Kruppel Like Factor 2, Lung(KLF2)ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：PH103234
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶(hù)提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

坎地沙坦酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Candesartan cilexetil  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 小鼠前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(E1)ELISA試劑盒 ，英文名： E1 ELISA Kit

鹽酸坦洛新（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tamsulosin    質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGI2 ELISA Kit

托芬那酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 小鼠前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGD2 ELISA Kit

甲鈷胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mecobalamin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

單白前苷B  Vincetoxicoside B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 ，英文名： PGE1 ELISA Kit

單硝酸異山梨酯  Isosorbide 5-mononitrate  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

單硝酸異山梨酯  Isosorbide 5-mononitrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T

2-單硝酸異山梨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Isosorbide 2-nitrate  質(zhì)量規(guī)格：檢查用 小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGE2 ELISA Kit

依那普利雙酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  XX  質(zhì)量規(guī)格：檢查用 小鼠前列腺素E2(PGE-2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGE-2 ELISA Kit

依那普利拉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Enalaprilat  質(zhì)量規(guī)格：檢查用 小鼠前列腺素E2合成酶(PGES)ELISA試劑盒 ，英文名： PGES ELISA Kit
Z-HL16C細(xì)胞，人胚肺成纖維細(xì)胞突變癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-6細(xì)胞 CL-0074DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2去乙酰地爾硫卓Desacetyl Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

SW620(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去[5-(2-二甲氨基)乙基]地爾硫卓Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HPAEC-c 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N,N-去二甲基地爾硫卓鹽酸鹽N,N-Didesmethyl Diltiazem 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)O-去乙酰-N-去甲基地爾硫卓O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

SEMA4A Others Human 人 SEMA4A / Semaphorin-4A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-去甲基地爾硫卓鹽酸鹽N-Desmethyl Diltiazem 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
小鼠脂聯(lián)素elisa試劑盒   小鼠脂聯(lián)素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脂聯(lián)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂聯(lián)素試劑盒、小鼠脂聯(lián)素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  N-Benzylmaleimide  1631-26-1  中文名：N-芐基馬來(lái)  分子式：C11H9NO2  度：98.0%   

小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  中文名：N-苯甲?；?L-酪氨酸乙酯  分子式：C18H19NO4  度：98.0%

小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           N-Boc-O-Benzyl-D-serine  47173-80-8  中文名：N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸  分子式：C15H21NO5 

KLF2人Kruppel樣因子2進(jìn)口檢測(cè)試劑盒小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1  中文名：  分子式：C29H58O5  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠脂肪酸合成酶   英文名稱(chēng)：   Mouse Fatty Acid Syhase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   FAS  N-Benzoyl-L-glutamic acid  中文名：N-苯甲酰-L-谷氨酸  分子式：C12H13NO5  度：98.0%