試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的生產批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

下列是公司產品ELISA試劑盒的詳細說明書：
中文名稱：PNOC人孤菲肽原進口檢測試劑盒
英文簡稱：Human Pronociceptin(PNOC)ELISA Kit
產品貨號：PH101910
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個月，-20℃一年

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
ELISA 試驗時，注意事項如下： 
     1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。

吲哚美辛（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Indometacin  人脂多糖/內(LPS)ELISA檢測試劑盒HumanLipopolysaccharides,LPSELISAKit 96T/48T  Humanai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

西米替汀質量規(guī)格：>99%,USP32,A型Cimetidine  大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒 Rat Peosidine ELISA Kit  Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit人鈣粘蛋白相關的神經受體1(C-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

西米替汀（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Cimetidine  英文名稱RatDHEAELISAKit大鼠脫氫表雄同(DHEA)規(guī)格：96T/48T  人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

阿德福韋/阿德福韋酯質量規(guī)格：>99%,可用于細胞培養(yǎng)Adefovir dipivoxil  紅細胞膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20  兔子Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)試劑盒 Rabbit cross linked C-telopeptide of type Ⅱ collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit
鈦鐵試劑(AR)質量規(guī)格：ARTiron  大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T  HumanapoproteinA5,apo-A5ELISA試劑盒人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鈦鐵試劑(95%)質量規(guī)格：0.95Tiron  人白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 Human Ierleukin 8 ELISA KIT  HumanCollectinELISAKit人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

四溴酚酞乙酯鉀鹽質量規(guī)格：INDTBPE  SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit綿羊1酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人5核苷酸酶(5-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

金蓮橙O質量規(guī)格：ARTropaeolin O  P38蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)試劑盒 Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit
洛莫司汀質量規(guī)格：>98%,BRLomustine  ELISAKitGH-RF人生長釋放因子規(guī)格：48T/96T  人抗人絨毛膜促性腺抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒 ，英文名： AhCGAb ELISA Kit

洛莫司?。藴势罚┵|量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Lomustine  小鼠補體成分3(C3)ELISA試劑盒 ，英文名： C3 ELISA Kit  Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苯氧乙酸(標準品)質量規(guī)格：分析標準品Phenoxyacetic acid  人蛋白C(ProteinC)ELISA檢測試劑盒HumanProteinCELISAKit 96T/48T  HumanFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒人凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

菲(標準品)質量規(guī)格：分析標準品,用于環(huán)境分析Phenanthrene  大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒 Rat Clara cell protein,CC16 ELISA Kit  HumanImmunoglobulinA，IgAELISAKit人球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PNOC人孤菲肽原進口檢測試劑盒檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。